尊龙凯时提供的强力霉素检测试剂盒（酶联免疫法）说明书，旨在为科研和临床检测提供详尽的使用指南。

1. 原理及用途

本试剂盒基于间接竞争ELISA方法，能够有效检测多种样本（如组织、蜂蜜、鸡蛋等）中的强力霉素（Doxycycline，DOX）药物。试剂盒包含预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品以及其他配套试剂。在检测过程中，样本中的强力霉素与酶标板上的偶联抗原竞争结合抗体，随后通过TMB底物显色来确定样本的药物残留量。

2. 技术指标

• 灵敏度：0.05 ppb (ng/ml)
• 反应条件：37℃，30分钟反应后，继续进行15分钟显色
• 检测下限：组织、肝脏、鸡蛋等样本为2 ppb，蜂蜜为2 ppb，尿样为0.5 ppb，牛奶为2 ppb，奶粉为4 ppb
• 交叉反应率：强力霉素100%，四环素14.3%，金霉素15%，土霉素15%
• 样本回收率（±20%）：组织85%，肝脏、鸡蛋75%，蜂蜜85%，尿样80%，牛奶及奶粉75%

3. 试剂盒组成

该试剂盒包含以下组件：

• 酶标板（96孔）
• 高浓度标准品溶液（10 ppm，1ml/瓶）
• 不同浓度的标准品溶液（0 ppb，0.05 ppb，0.15 ppb，0.45 ppb，1.35 ppb，4.05 ppb）
• 酶标记物、抗体工作液、底物液A、底物液B、终止液、洗涤液、复溶液
• 使用说明书、盖板膜、自封袋

4. 所需器材和试剂

• 仪器设备：酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、天平（感量0.01g）
• 微量移液器：单道（20µl-200µl，100µl-1000µl），多道（300µl）
• 试剂：浓盐酸、甲醇

5. 样本处理

在进行样本处理前，应确保实验器具干净并使用一次性吸头以避免实验结果受到污染。

5.1 组织、肝脏、鸡蛋样本处理方法

1. 称取均质后的样本，加入样本提取液，剧烈振荡并离心分离。
2. 取出上层液体，加入复溶液混匀。
3. 取样本进行分析，样本稀释倍数为40，检测下限为2 ppb。

5.2 蜂蜜样本处理方法

1. 称取蜂蜜样本，加入样本提取液，振荡混匀。
2. 取出混合液，加入复溶液混匀。
3. 进行分析，稀释倍数为40，检测下限为2 ppb。

5.3 尿样本处理方法

1. 用复溶液将尿样稀释，必要时过滤或离心。
2. 取稀释的尿样进行分析，稀释倍数为10，检测下限为0.5 ppb。

5.4 牛奶样本处理方法

1. 取牛奶样本，加入样本提取液，并进行振荡和离心。
2. 取上层液，加入复溶液混匀。
3. 取样本分析，稀释倍数为40，检测下限为2 ppb。

5.5 奶粉样本处理方法

1. 称取奶粉样本，加入样本提取液，然后振荡和离心。
2. 取上层液，加入复溶液并混匀。
3. 进行分析，稀释倍数为80，检测下限为4 ppb。

6. 酶联免疫试验步骤

取出所需试剂，调至室温，避免洗涤液结晶影响实验结果。在实验前配制标准品应用液，进行标定和加样反应，确保每个步骤按照要求进行以获得有效结果。

7. 结果分析

7.1 百分吸光率的计算

百分吸光率＝平均吸光度值 / 0 ppb标准吸光度值 × 100%

7.2 标准曲线的绘制与计算

通过标准液的百分吸光率绘制半对数曲线，利用样本百分吸光率与标准曲线获得样本浓度。

8. 注意事项

• 确保所有试剂和样本在规定环境下操作，避免影响结果。
• 避免使用过期试剂或不同批号的混用。
• 显色液变质应立即弃之，注意反应终止液的腐蚀性。

9. 储存及保存期

将试剂盒储存于2-8℃环境中，避免冷冻。有效期为1年，具体日期见包装盒标签。使用尊龙凯时的产品，保障您实验的准确性和可靠性。